Immortalized Rat Steroidogenic Granulosa Cells stably expressing FSH Receptor (GFSHR-17) T0605 

穩(wěn)定表達(dá)卵泡刺激素受體的永生化大鼠類固醇生成顆粒細(xì)胞

15000元  貨期2周

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BioSafety Level	II
Organism	25-day old immature female rat
Source Organ	Ovary
Growth Properties	Adherent
Recommended Seeding Density	Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions.
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Serial passaging and calcium phosphate mediated cotransfection by SV40 DNA and Ha-ras oncogene
Description	Follicle stimulating hormone (FSH) receptor, a receptor uniquely expressed in ovarian granulosa and testicular sertoli cells, play an important role in the regulation of oogenesis, spermatogenesis and steroid hormone production. Unfortunately FSH receptor expression is often lost within 1-2 days of in vitro culture of primary cells. The Immortalized Rat Steroidogenic Granulosa Cells stably expressing FSH Receptor is responsive to FSH stimulation and produces progesterone as a result at levels comparable to primary cells. This cell line is useful in studying FSH-FSH receptor interactions, as well as how FSH receptor regulates the development and maturation of ovarian follicle. Together with the Immortalized Rat Steroidogenic Granulosa Cells expressing LH Receptor (Cat. No T0606), researchers can compare the LH and FSH signaling in homologues cell systems.
Procedure Overview
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Propagation	Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow IV medium available from ABM (TM004). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999) to a final concentration of 5% and Penicillin/Streptomycin (G255). Atmosphere: air: 95%, CO2: 5%; Temperature: 37.0°C. To stimulate progesterone production, add 1.6 nM FSH, 100 nM dexamethasone and 50 μM forskolin to the complete culture medium for at least 24 hours.
Quality Control	1) Phenotypic response to FSH was characterized by shape changes (cells rounding up); 2) FSH receptor expression was measured by radiolabelled 125I-oFSH binding assay- the cells express 27,000 FSH receptors/cell with a Kd of 100-115 pM, similar to the native receptor; 3) Production of progesterone was determined by radioimmunoassay (RIA); 4) Production of cAMP was measured by a protein binding method
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